Identification of New Designer Benzodiazepine Diclazepam in Drug Facilitated Sexual Assault / 法医学杂志

OBJECTIVES@#To identify the new designer drugs which are totally unknown and not in the routine testing list by the technologies such as high-resolution mass spectrometry in drug facilitated sexual assault, in order to solve the problem in actual cases.@*METHODS@#The milky fluid from an actual case was extracted and analyzed using LC-QE, ¹H-NMR and GC-MS, respectively. The accurate masses and cluster ions isotope patterns of unknown compound were obtained by LC-QE. The molecular formula was confirmed as C₁₆H₁₂C₂N₂O based on the protons number of ¹H-NMR. The isomers diclazepam and 4-chlorodiazepam were separated and detected with GC-MS.@*RESULTS@#The new designer benzodiazepine as diclazepam in the milky fluid was identified. The results provided direct evidence for the investigation and qualitative analysis of such cases.@*CONCLUSIONS@#The combined application of various methods, including LC-QE, ¹H-NMR and GC-MS, can be used to detect unknown new psychoactive substances.

Estudo experimental da exposição ao PCB126 sobre a indução de Diabetes mellitus tipo II / Experimental study of PCB126 exposure on induction of Diabetes mellitus type II

A exposição ambiental aos poluentes orgânicos persistentes tem recebido amplo destaque na literatura recentemente devido à extensa associação entre o desenvolvimento de doenças metabólicas, obesidade e/ou diabetes mellitus, e a presença destes poluentes, principalmente os organoclorados, como as bifenilas policloradas (PCBs), no organismo. Por outro lado, os mecanismos de ação destes poluentes é controverso devido à elevada quantidade de representantes destas classes, gerando diversidade de protocolos de exposição e escassez de estudos experimentais. Por isto, foi objetivo deste trabalho elucidar os mecanismos de ação tóxica do PCB126, nas doses de 0,1; 1 ou 10 µg/kg de massa corpórea, em ratos Wistar machos, durante quinze dias, expostos por instilação intranasal. O procotolo de exposição empregado foi caracterizado e considerado suficiente para causar toxicidade, uma vez que foram observadas alterações no sistema imune, metabolismo e em parâmetros relacionados à gênese do diabetes mellitus. A caracterização da exposição foi determinada pela quantificação da concentração de PCB126 no fígado e pulmão (CG/MS) e pelo aumento da expressão do receptor aril hidrocarboneto (AhR) no rim, fígado, pulmão e tecido adiposo (Western Blot). O efeito imunossupressor do PCB126 foi evidenciado pelo comprometimento da produção de células na medula óssea e, consequentemente, no número de células totais no sangue circulante. Adicionalmente, foi evidenciada a interferência do poluente na via de ativação mediada por receptores acoplados à proteína G (GPCRs), principalmente em neutrófilos, alterando importantes funções destas células, como a expressão de moléculas de adesão, geração de espécies reativas de oxigênio e migração. Entre as alterações metabólicas observadas, destacamos o aumento dos níveis de triglicerídeos e colesterol sérico, aumento da liberação de ácidos graxos livres; aumento da atividade da enzima hepática gama glutamil transferase; aumento da resistência à insulina e aumento da geração de óxido nítrico pelas ilhotas de Langerhans, dados estes, possivelmente relacionados ao comprometimento das células beta (ß) pancreáticas, confirmados pelo aumento da expressão de GLUT4 no tecido adiposo, aumento da concentração de insulina sérica e aumento do estresse oxidativo nas ilhotas de Langerhans. Em conjunto, os dados obtidos destacam importantes alterações causadas pela exposição intranasal ao PCB126, evidenciando a participação do poluente na gênese do diabetes mellitus do tipo II

The environmental exposure to persistent organic pollutants has been widely highlighted in recent literature due to the extensive association between the development of metabolic diseases, obesity and/or diabetes mellitus, and presence of these pollutants, especially organochlorines such as polychlorinated biphenyls (PCBs) in organism. Moreover, the mechanisms of action of these pollutants are controversial due to the high number of PCBs congeners, diversity of exposure protocols and lack of experimental studies. Therefore, the aim of this study was to elucidate the mechanisms of PCB126's toxic action at doses of 0.1; 1 or 10 µg/kg body weight in male Wistar rats exposed by intranasal instillation for 15 days. The established exposure procotol was characterized and considered sufficient to cause toxicity since changes were observed in the immune system, metabolism and in parameters related to the pathogenesis of diabetes mellitus. Characterization of exposure was determined by quantifying the concentration of PCB126 in liver and lung (GC-MS) and by the increased expression of aryl hydrocarbon receptor (AhR) in kidney, liver, lung, and adipose tissue (Western blot). The immunosuppressive effect of PCB126 was evidenced by impairment of cell production in the bone marrow and thus the total number of cells in the circulation. In addition, the interference of the pollutant in the activation pathway mediated by G-protein coupled receptors (GPCRs), in particular in neutrophils, was observed by changing important functions of these cells such as the expression of adhesion molecules, reactive oxygen species generation, and migration. Among the metabolic changes observed, we highlight the increased levels of triglycerides and serum cholesterol, increased release of free fatty acids; increased gamma glutamyl transferase hepatic enzyme activity; increased insulin resistance and increased generation of nitric oxide by the islets of Langerhans, these data possibly related to the impairment of beta cells (ß) pancreatic function, suggested by the increased expression of GLUT4 in adipose tissue, increased serum insulin concentration and increased oxidative stress in the islets of Langerhans. Altogether, these results highlight important changes caused by intranasal exposure to PCB126, suggesting participation of the pollutant in the genesis of diabetes mellitus type II

Acute copper toxicity in juvenile fat snook Centropomus parallelus (Teleostei: Centropomidae) in sea water

Three experiments were designed to assess the accumulation and acute toxicity of copper (Cu) in juvenile fat snook Centropomus parallelus. The first experiment was performed to determine the 96-h lethal concentration (LC50) of Cu. The second experiment was designed to assess the effects of sublethal concentrations of Cu (0.47 and 0.94 mg/L), while the third one allowed us to test the recovery capacity of fish exposed to the sublethal concentrations Cu and kept in sea water without Cu addition. The LC50 value for Cu was found to be 1.88 mg/L Cu. Fish exposed to the sublethal concentrations of Cu showed a significant accumulation of Cu in gills at 96 h respect to the control ones (0.43 µg/g Cu). No significant difference was observed in the accumulation of Cu in gills between fish exposed to 0.47 mg/L (1.09 µg/g Cu) and 0.94 mg/L (1.26 µg/g Cu). Exposure (24 and 96 h) to the sublethal concentrations of Cu tested induced DNA damage in the erythrocytes. The results show that acute exposure to sublethal concentrations induces Cu accumulation and DNA damage in fish, these effects being recovered after 240 h in sea water without Cu addition.

Três experimentos foram realizados para avaliar o acúmulo e toxicidade aguda do cobre (Cu) em juvenis de robalo-peva Centropomus parallelus. O primeiro experimento foi realizado para determinar a concentração letal (96h-CL50) de Cu. O segundo experimento foi realizado para avaliar os efeitos de concentrações subletais de Cu (0,47 e 0,94 mg/L), enquanto o terceiro permitiu testar a capacidade de recuperação dos peixes expostos a concentrações subletais do Cu e posteriormente mantidos em água do mar sem acréscimo de Cu. O valor de LC50 encontrado para o Cu foi de 1,88 mg/L. Os peixes expostos as concentrações subletais de Cu mostraram um acúmulo significativo nas brânquias em relação ao controle em 96 h de exposição (0,43 µg/g Cu). Nenhuma diferença significativa foi observada entre os peixes expostos a 0,47 mg/L de Cu (1,09 µg/g) e 0,94 mg/L de Cu (1,26 µg/g). A exposição (24 e 96 h) para as concentrações subletais de Cu induziram danos no DNA. Os resultados mostram que a exposição aguda a concentrações subletais induz o acúmulo de Cu e danos ao DNA nas brânquias dos peixes, onde estes efeitos são recuperados após 240 h em água do mar sem adição de Cu.

Thalassophryne nattereri fish venom: from the envenoming to the understanding of the immune system

Thalassophryne nattereri (niquim) is a venomous fish found off North and Northeast coast of Brazil, where it is known by the severity of the accidents involving humans. This review article is divided into four topics. The first one provides a brief description of the animal biology and its distribution off Brazilian coastal waters, the venom apparatus, signs and symptoms observed in envenomated humans and also describes envenomation in mice. The second topic describes the use of modern genetic approach and mass spectrometry for identification of highly expressed genes in its venom glands and the sequence of major toxins. The third chapter offers a detailed study of tissue injury induced by the venom and reveals the role of toxins that impair inflammation reduction. Finally, the fourth section expands the understanding of many extrinsic and intrinsic essential factors in maintaining survival of memory B cell compartment. Our results demonstrate the wide possibilities for research in the area of toxinology, also the necessity of interconnection among biochemistry, pharmacology and immunology areas for the expansion of knowledge and for generation of innovation.

Thalassophryne nattereri fish venom: from the envenoming to the understanding of the immune system

Thalassophryne nattereri (niquim) is a venomous fish found off North and Northeast coast of Brazil, where it is known by the severity of the accidents involving humans. This review article is divided into four topics. The first one provides a brief description of the animal biology and its distribution off Brazilian coastal waters, the venom apparatus, signs and symptoms observed in envenomated humans and also describes envenomation in mice. The second topic describes the use of modern genetic approach and mass spectrometry for identification of highly expressed genes in its venom glands and the sequence of major toxins. The third chapter offers a detailed study of tissue injury induced by the venom and reveals the role of toxins that impair inflammation reduction. Finally, the fourth section expands the understanding of many extrinsic and intrinsic essential factors in maintaining survival of memory B cell compartment. Our results demonstrate the wide possibilities for research in the area of toxinology, also the necessity of interconnection among biochemistry, pharmacology and immunology areas for the expansion of knowledge and for generation of innovation.

Application of Comet assay to assess the effects of white bean meal on DNA of human lymphocytes

This study was conducted to evaluate the potential induction of genotoxic effects of white bean flour using the Comet assay. The test was conducted with human lymphocytes present in whole blood immediately after collection, by incubation with white bean flour in three concentrations (3.92, 9.52 and 18.18 mg/mL) at 37 ºC for 4 h followed by preparation of slides. Samples were considered positive (above 20% damage) when the damage observed to cellular DNA was higher than the negative control. No genotoxic potential was found at the doses tested. However, it would be premature to suggest absence of risk to human health of DNA damage since the exposure of cells to the extract was restricted to four hours rather than a whole cell cycle. Additionally, further information on toxicology should be obtained in future studies.

Este estudo foi realizado para avaliar o potencial de indução de efeitos genotóxicos da farinha de feijão branco utilizando o teste do Cometa. O ensaio foi realizado com linfócitos humanos presentes no sangue imediatamente após a coleta, por incubação com farinha de feijão branco em três concentrações (3,92, 9,52 e 18,18 mg/mL) a 37 ºC por 4 h, seguida de preparação das lâminas. As amostras foram consideradas positivas (acima de 20% de dano), quando os danos observados no DNA celular foram maiores do que o controle negativo. Verificou-se que as doses testadas não mostraram potencial genotóxico. No entanto, seria prematuro fazer recomendações sobre o padrão de riscos para a saúde humana resultantes de danos ao DNA já que exposição das células ao extrato foi restrito ao período de quatro horas e não durante um ciclo celular completo. Além disso, outras informações sobre a toxicologia devem ser obtidas no futuro.

Toxicological and pharmacological evaluation of Discaria americana Gillies & Hook (Rhamnaceae) in mice

Medicinal plants (e.g. Discaria americana) have been used by populations for centuries. However, popular use is not enough to validate these plants as safe and effective medicinal products. The present study sought to evaluate the acute and subacute toxicity as well as the anxiolytic and antinociceptive effects of D. americana root bark and aerial parts extracts in mice. In acute toxicity studies, mice were treated with single intraperitoneal doses of the aforementioned extracts. Subacute toxicity studies were performed by oral administration of the extracts over 14 days. Anxiolytic studies consisted of the elevated plus maze method, and antinociceptive studies were based on the hot plate test. The LD50 value for D. americana aerial parts extract was established at >500 mg/kg, and for the root bark extract, 400 mg/kg. D. americana aerial parts extract produced anxiolytic (250 mg/kg) and antinociceptive effects (125, 200 and 250 mg/kg). Conversely, D. americana root bark extract showed neither anxiolytic nor antinociceptive effects in mice.

As plantas medicinais (i. e. Discaria americana) têm sido utilizadas pela população por séculos, entretanto, o conhecimento popular não é suficiente para validá-las como medicamentos seguros e/ou efetivos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar a toxicidade aguda e subaguda, bem como o efeito ansiolítico e antinociceptivo dos extratos da casca da raiz e das partes aéreas da D. americana em camundongos. A toxicidade aguda foi avaliada pela administração dos extratos, via intraperitoneal. Para o estudo da toxicidade subaguda os animais foram tratados oralmente com os extratos por 14 dias. O efeito ansiolítico dos extratos foi determinado através do modelo do labirinto em cruz elevado e o efeito antinociceptivo, mediante o teste da placa quente. O valor da DL50 para o extrato das partes aéreas da D. americana foi definido como > 500 mg/kg, enquanto que para o extrato da casca da raiz foi estabelecido em 400 mg/kg. O extrato das partes aéreas da D. americana apresentou atividade ansiolítica (250 mg/kg) e antinociceptiva (125, 200 e 250 mg/kg). O extrato da casca da raiz da D. americana não apresentou efeito ansiolítico nem antinociceptivo.

Toxicology and safety of the tincture of Operculina alata in patients with functional constipation

The tincture of Operculina alata, popularly known as "tincture of jalapa", is used in Northeast Brazil to treat constipation and encephalic vascular accident, but it has not yet been adequately tested for safety and efficacy. The aim of this study was to evaluate the toxicology and safety of the tincture of O. alata in patients with functional constipation. This was a double-blind, randomized, placebo-controlled clinical trial. The study consisted of three phases: pre-treatment, treatment and post-treatment, each phase with duration of seven days. Arterial pressure, heart rate, body weight, adverse events, hematological, metabolic, liver and kidney functions were monitored. Forty patients were randomized to receive tincture of O. alata and 43 patients to receive placebo. There were statistical differences in the clinical aspects between groups, but these changes were not considered clinically significant. Adverse events were considered not serious and of mild intensity, especially dizziness, headache, abdominal pain and nausea. This clinical trial confirmed the safety of the tincture of O. alata in the pharmaceutical form and dosage tested, allowing the product to be safely used in a larger population for the assessment of its clinical efficacy.

A tintura de Operculina alata, popularmente conhecida como "tintura de jalapa", é usada no Nordeste do Brasil para tratar constipação intestinal e acidente vascular encefálico, mas sua eficácia e segurança ainda não foram confirmadas. O objetivo deste estudo foi avaliar a toxicologia e segurança da tintura de O. alata em pacientes com constipação intestinal funcional. Este foi um ensaio clínico duplo-cego, randomizado e controlado por placebo. O estudo consistiu de três fases: pré-tratamento, tratamento e pós-tratamento, cada fase com duração de sete dias. Foram monitorizados a pressão arterial, frequência cardíaca, peso corporal, eventos adversos e funções hematológica, metabólica, hepática e renal. Quarenta pacientes foram randomizados para receber tintura de O. alata e 43 pacientes para receber placebo. Houve diferenças estatísticas nos aspectos clínicos entre os grupos, contudo, estas mudanças não foram consideradas clinicamente significativas. Eventos adversos foram considerados não sérios e de leve intensidade, especialmente, cefaléia, tontura, dor abdominal e náusea. Este ensaio clínico confirmou a segurança da tintura de O. alata na forma farmacêutica e dosagem testada, permitindo que o produto seja testado em população maior para determinar sua eficácia clínica.

Single gas chromatography method with nitrogen phosphorus detector for urinary cotinine determination in passive and active smokers

Nicotine is a major addictive compound in cigarettes and is rapidly and extensively metabolized to several metabolites in humans, including urinary cotinine, considered a biomarker due to its high concentration compared to other metabolites. The aim of this study was to develop a single method for determination of urinary cotinine, in active and passive smokers, by gas chromatography with a nitrogen phosphorus detector (GC-NPD). Urine (5.0 mL) was extracted with 1.0 mL of sodium hydroxide 5 mol L-1, 5.0 mL of chloroform, and lidocaine used as the internal standard. Injection volume was 1 ìL in GC-NPD. Limit of quantification was 10 ng mL-1. Linearity was evaluated in the ranges 10-1000 ng mL-1 and 500-6000 ng mL-1, with determination coefficients of 0.9986 and 0.9952, respectively. Intra- and inter-assay standard relative deviations were lower than 14.2 %, while inaccuracy (bias) was less than +11.9%. The efficiency of extraction was greater than 88.5%. Ruggedness was verified, according to Youden's test. Means of cotinine concentrations observed were 2,980 ng mL-1 for active smokers and 132 ng mL-1, for passive smokers. The results revealed that satisfactory chromatographic separation between the analyte and interferents was obtained with a ZB-1 column. This method is reliable, precise, linear and presented ruggedness in the range evaluated. The results suggest that it can be applied in routine analysis for passive and active smokers, since it is able to quantify a wide range of cotinine concentrations in urine.

A nicotina é uma substância presente no cigarro capaz de causar dependência, sendo biotransformada em vários metabólitos nos seres humanos, dentre eles a cotinina urinária, que é considerada um indicador biológico de exposição à nicotina, devido a suas altas concentrações, comparado a outras matrizes. Assim, o objetivo deste estudo foi desenvolver um único método para determinação de cotinina urinária, em amostras de urina de fumantes ativos e passivos, através de cromatografia em fase gasosa com detector de nitrogênio- fósforo (CG-DNF). Para o preparo de amostras foram utilizados 5 mL de urina, 1 mL de hidróxido de sódio 5 mol L-1, 5 mL de clorofórmio, tendo como padrão interno a lidocaína. Na faixa de concentrações de 10-1000 ng mL-1 e 500- 6000 ng mL-1, o coeficiente de determinação foi 0,9986 e 0,9952, respectivamente e, o limite de quantificação foi 10 ng mL-1. A precisão intra- e interensaio apresentou desvio padrão relativo (%) menor que 14,2% e a inexatidão foi menor que +11,9%, com uma eficiência de extração de 88,5%. O método apresentou robustez, de acordo com o teste de Youden. As concentrações médias de cotinina observadas foram 2980 ng mL-1, para fumantes ativos e 132 ng mL-1, para fumantes passivos. Os resultados sugerem que o método é confiável, preciso, linear e apresentou robustez, na faixa avaliada, podendo ser aplicado na rotina para análises de amostras de fumantes ativos e passivos, pois é capaz de quantificar uma ampla faixa de concentrações de cotinina urinária.

Five year survey of toxicological testing of clinical body fluid samples at the poison control centre in the Indian State of Kerala.

The Poison Control Centre (PCC) at Amrita Institute of Medical Sciences, Kerala, was established in June 2003, but became fully operational from January 2005. There are only four PCCs in India recognized by the World Health Organization, of which this is one. A five-year (2005 to 2009) review of biological samples analyzed for chemicals, drugs and toxins by the analytical laboratory attached to the PCC is presented to give an indication of the commonest types of poisoning encountered in this region of India, aside from venomous bites and stings. Such data are not adequately available so far, which is also true for other parts of the country. Results of the survey show that there has been a steady rise in the receipt of samples over the entire period from 432 in 2005 to 601 in 2009. Among the samples analyzed, the commonest toxicants are pesticides, pharmaceuticals, heavy metals and alcohols. Of the pesticides, organophosphates accounted for the maximum number, while most of the remaining comprised zinc phosphide, carbamates, pyrethroids, paraquat, phosphorus, and bromadiolone. Aluminium phosphide, which is a common pesticide in some other regions, was virtually non-existent, while zinc phosphide, a rodenticide, is the second highest in incidence. Of the pharmaceuticals, the largest number comprised sedativehypnotics, while antipyretic drugs, especially paracetamol, accounted for a most of the remaining. Of the metals, the commonest was lead, followed by arsenic, mercury, iron, etc. Requests for copper testing were common, but mostly pertained to Wilson‟s disease, and not toxicity. Among the alcohols, ethanol was the commonest. Even though Kerala is rich in flora, plant toxins were low in incidence, because of the difficulty in testing for such toxins, as compared to chemicals. Bites and stings were not included in this study. Therapeutic monitoring of drugs, which accounts for a large number of samples received by the laboratory was also not part of the survey.

¿Cuál es la utilidad clínica de un estudio toxicológico? / Clinical usefulness of toxicology testing

A toxicology testing is the search by the laboratory of the possible etiologic agents that can cause poisoning. Given the wide variety of substances that can poison a person, the laboratories should work coordinated with the emergency wards in order to determine the appropriate tests menu and the required turn around time according to the most frequent causes of intoxication in the local population. Toxicology laboratories should provide two tiers of drug testing: selected drug tests in blood/urine and comprehensive or broad-spectrum toxicological testing in the same or other samples. The medical order must always include the suspected diagnosis, which is responsibility of the physician requesting the test. A most important issue in the study of a poisoned patient is the opportunity when the samples are drawn, which should be at the emergency room since a delay in sample collection implies losing unrecoverable information. Samples should be sent to the laboratory for either immediate analysis or later comprehensive toxicological tests, so that laboratories must have procedures for the proper storage and preservation of samples. Poison control centers provide assistance to clinicians in considering certain drugs etiologies and in selecting specific tests.

Un estudio toxicológico es ¡a búsqueda por parte del laboratorio de ¡os posibles agentes etiológicos de un cuadro clínico de intoxicación. Dada la gran variedad de sustancias con que se puede intoxicar un individuo, los laboratorios deben trabajar coordinadamente con los Servicios de Urgencia para consensuar los exámenes necesarios en esta área y sus tiempos de respuesta, de acuerdo al tipo de población y las causas de intoxicaciones más frecuentes en su medio local. Los laboratorios toxicológicos deben proveer dos niveles de exámenes: los análisis específicos de drogas en sangre/orina y los estudios toxicológicos avanzados o ampliados en estas mismas muestras u otras. La orden médica siempre debe incluir ¡a sospecha diagnóstica, ¡o cual es responsabüidad del médico que solicita el examen. Lo más importante para el estudio de un paciente intoxicado es el momento de la obtención de las muestras, que debe ser al ingreso en el Servicio de Urgencia, ya que un retraso en tomarlas implicaría la pérdida de una información irrecuperable. Las muestras deben ser enviadas al laboratorio, ya sea para su análisis inmediato o para estudios toxicológicos ampliados posteriores, por lo que los laboratorios deben tener procedimientos para el correcto almacenamiento y preservación de las muestras. Los Centros de Información Toxicológica colaboran con el clínico orientándolo en la solicitud de exámenes, como también entregándole información acerca de las posibles drogas involucradas en una intoxicación

Síntese e aplicações estratégicas de neurotoxinas produzidas por cianobactérias / Synthesis and strategic applications of some neurotoxins produce for cyanobacteria

As cianobactérias apresentam, distribuição variada e podem ocorrer desde as regiões frias do ártico até os trópicos, em corpos d'água doce e no ambiente marinho. Algumas espécies de cianobactérias produzem compostos com conhecida toxidade, podendo causar efeitos deletérios em seres humanos e animais. Entre estes compostos estão os com atividade neurotóxica devido aos mais variados mecanismos de ação. O objetivo geral deste projeto é a obtenção por via sintética de algumas neurotoxinas e variantes, entre elas a β-N-metil-L-alanina (L-BMAA), anatoxina-a e anatoxina-a(s), bem como algumas aplicações. Para a L-BMAA, foi buscada a determinação de rotas sintéticas viáveis para a obtenção deste aminoácido modificado sob a forma racêmica e enantiomericamente pura, além de um possível produto cíclico que pode ser gerado naturalmente a partir da L-BMAA. Algumas rotas estratégicas foram determinadas com êxito para a síntese destes compostos. Entre as aplicações dos produtos obtidos podem ser citados: (i) a determinação de um método analítico para a determinação deste aminoácido por RMN de 1H; (ii) um método analítico por LC-MS utilizando D3-L-BMAA como padrão interno e (iii) a indicação de um possível mecanismo de neurotoxidade ligado a neurodegeneração via um intermediário produzido naturalmente do equilíbrio entre L-BMAA e íons bicarbonato...

Um estudo dos textos clássicos do Ayurveda em perspectiva histórico-antropológica / A study of classical texts of Ayurveda in a historical and anthropological perspective

Nas últimas duas décadas a racionalidade médica ayurvédica tornou-se popular no ocidente e está se expandindo rapidamente. Esta expansão é conseqüência do renascimento do Ayurveda na Índia no século XX. Apesar do crescente interesse neste sistema antigo de medicina pouco se tem explorado, no nosso meio, da sua gênese Histórica e das pesquisas dos textos clássicos, riquíssimos em informações sobre esta antiga medicina e suas ferramentas de diagnóstico e terapêutica prevalentes no subcontinente indiano há milhares de anos. O renascimento do Ayurveda se intensificou após a libertação da Índia da dominação britânica em 1947. Na década de 50 vários esforços foram realizados para promover o ensino e desenvolvimento desta racionalidade médica pelo governo indiano...

Estudo comparativo entre os métodos in vivo e in vitro na análise toxicológica de produtos de higiene descartáveis e sua avaliação microbiológica / Comparative study between in vivo and in vitro toxicological methods and microbiological quality assessment in disposable hygienic products

Os objetivos deste trabalho foram comparar os métodos in vivo e in vitro na avaliação da toxicidade dérmica e estimar a qualidade microbiológica de 60 amostras de produtos de higiene descartáveis comercializados na cidade de São Paulo. Nos testes de toxicidade in vivo foram utilizados o “Método deDraize” e o “Método Modificado por Magnusson e Kligman” e nos testes in vitro o Método de “difusão em agar”, empregando as linhagens celulares, NCTC clone 929 (ATCC- CCL1) e SIRC (ATCC-CCL-60). A análise microbiológica foi realizada de acordo com o “Bacteriological Analytical Manual OnLine”, 2001. Os produtos analisados não apresentaram irritação dérmica primária, cumulativa e sensibilização cutânea, mas nos testes in vitro, foi observada em 18 amostras toxicidade leve à severa, com índice de zona (IZ) variando de 2,0 - 4,0 nas duas linhagens celulares testadas. A análise microbiológica apresentou número elevado de bactérias aeróbias mesófilas, resultados positivos para bolores, presença de Enterobacter sp, Enterobacter agglomerans e Enterobacter cloacae. De acordo com os resultados obtidos e para garantir a segurança da saúde do usuário recomenda-se que, além dos testes já mencionados pela legislação vigente, seja também preconizado teste de citotoxicidade in vitro, para os produtos de uso interno e externo. A realização prévia deste teste pode se constituir em mecanismo de triagem.

O teste de toxicidade com bactérias luminescentes e o controle da poluição das águas / Toxicity Tests Using Luminescent Bacteria and Water Pollution Control

O teste de toxicidade aguda com bactérias luminescentes testa usa como organismo de teste Vibrio fischeri, uma bactéria marinha luminescente. Uma cultura das bactérias é exposta à amostra do teste por um período de 15 minutos, e a quantidade de luz que emitem é medida por um fotômetro especial. Quanto mais toxica a amostra, tanto menor a quantidade de luz produzida pelas bactérias. A metodologia é estandartizada internacionalmente. O teste tem uma escala de sensibilidade similar à de outros biotestes aquáticos de toxicidade, como os feitos com a espécie de água doce Pimephales promela (peixe-isca), com a Daphinia (pulga d´água), e com a espécie Oncorhynchus mykiss (truta-arco-íris). Diversas vantagens do procedimento podem ser indicados: requer somente volumes pequenos de amostra (5 ml); as bactérias são de fácil conservação e armazenamento; é muito rápido (15 minutos) e é deveras reproduzível. A desvantagem, dado que as bactérias são organismos marinhos, é a necessidade de adicionar solução osmótica para fins de ajuste ao testar amostras com menos de 2 por cento de salinidade, o que pode interferir na resposta tóxica de algumas espécies químicas. O teste tem sido aplicado com sucesso pela CETESB, o órgão de proteção ambiental do Estado de São Paulo, desde 1986 para avaliar a qualidade de efluentes industriais, águas de superfície, amostras do solo e de sedimento, sendo considerado uma importante ferramenta especial na avaliação da eficiência do tratamento a de efluentes, bem com o da eficácia dos programas de monitoramento para verificar a eficiência das ações de controle e prevenção da poluição.

Vigilância toxicológica: comprovação do uso de álcool e drogas através de testes toxicológicos / Toxicological surveillance: evidence of alcohol and drugs by toxicological tests

O objetivo deste livro é ser uma fonte de informação para profissionais que têm que lidar com testes toxicológicos para comprovação do uso de álcool e drogas, no seu dia-a-dia, auxiliando-os na escolha dos mesmos e nos critérios para sua aplicação...

Reversion mutation in dark variants of luminous bacteria and its application in gene toxicant monitoring / 华中科技大学学报（医学）（英德文版）

The luminous intensity of dark variant (S1) separated from photobacterium phosphoreum (A2) was 1/10,000 less than that of wild-type. Ethidium bromide (EB) (0.6 mg/L), Mytomycin C (MC, 0.05 mg/L), 2-amino fluorene (2-AF, 1.0 mg/L) all could strongly induce reversion mutation for S1 within 24 h and increase reversion ratio significantly. The results of experiments indicated that these revertants had stable genetic characteristic and the mutation may take place at gene levels. The mutagenesis to S1 caused by EB, MC and 2-AF was detected and it may be used as a new rapid, simple and sensitive method for gene toxicant monitoring.

Evaluation of the Cytotoxicity of Polyetherurethane (PU) Film Containing Zinc Diethyldithiocarbamate (ZDEC) on Various Cell Lines

A polyetherurethane (PU) film containing 0.1% zinc diethyldithiocarbamate (ZDEC) is the international standard reference material for testing the in vitro cytotoxicity of polymer based biomaterials. Nowadays, culturing L929 or BALB/3T3 cells in direct contact or in an extract dilution condition is the most frequently using method for evaluating the cytotoxicity from biomaterials and medical devices. However, the results often vary, because it is directly related to the cellular functions and the mechanism of the toxicity of the contacting cells. In this study, 13 cell lines originating from various tissues were used to detect the cytotoxic activities of a PU film containing 0.1% ZDEC (PU-ZDEC). The correlation between the reactivity zone size and the relative cytotoxicity by quantifying the released total protein from each cell in the direct contact testing method was investigated. Hepa-1c1c7 cells demonstrated the highest sensitivity in the reactivity zone size, while CHO/dhFr(-) cells were the most sensitive in terms of the relative cytotoxicity. A correlation between the two processes in each cell line was not found (r=-0.478). In the extract dilution method, which involved cultivating the cells in the medium with various ZDEC concentrations prepared by diluting the PU incubation, the cytotoxicity increased with increasing ZDEC concentration in all cell lines. The BALB/ 3T3 cells demonstrated the highest sensitivity in the extract dilution method. No correlation in a comparison of the relative cytotoxicity from the direct contact method with the extract dilution method in each cell line, was found (r=-0.445). In this experiment, Hepa-1c1c7, BALB/3T3, CHO/dhFr(-) and L-929 cells among the 13 types of cell lines were the sensitive cell lines according to the two methods. The preliminary results suggest that a comparison of at least one or more cytotoxicity testing methods and many cell lines is necessary for an in vitro cytotoxicity test of biomaterials.